細(xì)胞株是指通過(guò)原代培養(yǎng)后成功傳代并具有穩(wěn)定生長(zhǎng)特性的細(xì)胞群體,通常來(lái)源于特定組織或個(gè)體,具備無(wú)限增殖能力或有限傳代能力,是生物醫(yī)學(xué)研究、藥物開發(fā)和細(xì)胞治療中的核心工具。
生物性污染風(fēng)險(xiǎn):
支原體污染:
特點(diǎn):無(wú)細(xì)胞壁、體積?。?.2-0.3μm),能穿透濾膜,常規(guī)顯微鏡下不可見。
影響:改變細(xì)胞代謝、抑制增殖、干擾基因表達(dá),長(zhǎng)期存在可導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)失真。
來(lái)源:操作人員呼氣、未滅菌耗材、血清污染或鄰近污染細(xì)胞擴(kuò)散。
防控:每月定期檢測(cè)(PCR法或熒光染色);新引入細(xì)胞株必須隔離并檢測(cè)。
細(xì)菌與真菌污染:
表現(xiàn):培養(yǎng)基變渾、變色(發(fā)黃)、出現(xiàn)絮狀物或漂浮顆粒。
來(lái)源:超凈臺(tái)濾網(wǎng)老化、操作不規(guī)范、培養(yǎng)基滅菌不徹底、手套/移液器交叉使用等。
防控:使用前對(duì)所有試劑和耗材進(jìn)行無(wú)菌檢查;操作全程保持無(wú)菌環(huán)境;避免頻繁開啟培養(yǎng)箱門。
病毒及其他微生物污染:
雖較少見,但某些病毒可潛伏于細(xì)胞內(nèi),影響特定實(shí)驗(yàn)。
非生物性污染風(fēng)險(xiǎn):
化學(xué)污染:
來(lái)自殘留洗滌劑、重金屬、內(nèi)毒素或劣質(zhì)DMSO,可導(dǎo)致細(xì)胞應(yīng)激、貼壁不良或死亡。
防控:使用無(wú)酶無(wú)內(nèi)毒素的超純水配制試劑;DMSO選用細(xì)胞級(jí)、密封保存。
物理污染:
如凍存管密封不嚴(yán)、液氮滲入導(dǎo)致爆炸風(fēng)險(xiǎn);或反復(fù)凍融造成冰晶損傷細(xì)胞膜。
防控:凍存管擰緊但不過(guò)力;轉(zhuǎn)移至液氮前放入專用密封盒;避免多次凍融。